Cantas veces te sentes axitado, facilmente molesto e nervioso entre as comidas? Cantas veces dependes do café para seguir adiante? ¿Con cantas veces tes dificultades para concentrarte antes de comer? A inflamación é unha reacción esencial do corpo humano. O sistema inmunitario desencadea para protexernos de lesións, infeccións e / ou enfermidades. Non obstante, que ocorre se hai moita inflamación no corpo humano? E, que pasa se hai moita inflamación no cerebro?   A neuroinflamación pode causar unha serie de problemas de saúde, como ansiedade, estrés, depresión, néboa cerebral, fatiga e incluso letarxia, entre outros síntomas coñecidos. Afortunadamente, hai un remedio natural que pode axudar a reducir enormemente a inflamación e mellorar a función cerebral. Segundo estudos de investigación, a curcumina pode axudar a combater a neuroinflamación. O propósito do artigo a continuación é analizar os efectos antiinflamatorios da curcumina na microglia, a saúde cerebral e o benestar.  

Efectos antiinflamatorios da curcumina nas células microgliales

 

Abstracto

O ácido lipoteicoico (LTA) induce moléculas neuroinflamatorias, contribuíndo á patoxénese de enfermidades neurodexenerativas. Polo tanto, a supresión de moléculas neuroinflamatorias podería desenvolverse como método terapéutico. Aínda que os datos anteriores admiten un efecto inmunomodulador da curcumina, as vías de sinalización subxacentes non están en gran parte identificadas. Aquí, investigamos as propiedades antineuroinflamatorias da curcumina en células microgliais BV-2 estimuladas por LTA. Factor de necrose tumoral de citocinas inflamatorias-? A curcumina inhibiu a secreción de [TNF-?, prostaglandina E2 (PGE2) e óxido nítrico (NO] nas células microgliais inducidas por LTA. A curcumina tamén inhibiu as NO sintases inducidas por LTA (iNOS) e a ciclooxixenase-2 (COX-2). Posteriormente, os nosos estudos mecanicistas revelaron que a curcumina inhibe a fosforilación inducida por LTA da proteína quinase activada por mitógenos (MAPK), incluíndo ERK, p38, Akt e a translocación de NF-?B. Ademais, a hemoosixenase (HO)-1HO- inducida por curcumina. Expresión do factor 1 e do factor nuclear eritroide 2 relacionado co factor 2 (Nrf-2) nas células microgliais. A inhibición de HO-1 reverteu o efecto inhibidor da HO-1 sobre os mediadores inflamatorios liberados nas células microgliais estimuladas por LTA. En conxunto, os nosos resultados suxiren que a curcumina podería ser un axente terapéutico potencial para o tratamento de trastornos neurodexenerativos mediante a supresión das respostas neuroinflamatorias. Palabras clave: curcumina, neuroinflamación, TLR2, HO-1, células microgliales  

introdución

A neuroinflamación crónica xoga un papel importante en varias enfermidades neurodexenerativas, incluíndo EA, enfermidade de Parkinson (EP), enfermidade de Huntington (HD), ictus, esclerose lateral amiotrófica (ELA) e esclerose múltiple (EM) (Spangenberg e Green, 2017). A neuroinflamación é intercedida pola activación da microglia, as células efectoras principais e as células inmunitarias residentes do SNC (Nakagawa e Chiba, 2015). As células microgliais poden activarse en resposta á morte neuronal ou ao dano neuronal inducido por respostas neuroinflamatorias ou por toxinas extracelulares, como bacterias e patóxenos (Larochelle et al., 2015). Na neuroinflamación, a microglia activada libera varios tipos de citocinas, quimiocinas, especies reactivas de osíxeno e especies reactivas de nitróxeno para o desenvolvemento e mantemento de respostas inflamatorias (Moss e Bates, 2001). A produción excesiva destes mediadores inflamatorios pode causar danos neuronais e a morte. A evidencia acumulada suxire que o control da activación microglial podería atenuar a gravidade da enfermidade neurodexenerativa (Perry et al., 2010). Polo tanto, o desenvolvemento de axentes antineuro-inflamatorios para a inhibición da activación da microglia podería ser beneficioso para o tratamento de enfermidades neurodexenerativas.   Microglia expresa receptores de recoñecemento de patróns (PRR) que poden unirse a patróns moleculares asociados a patróns (PAMP) e patróns moleculares asociados a danos (DAMP) como os lipopolisacáridos (LPS) e o ácido lipoteicoico (LTA), respectivamente (Jack et al., 2005). ). Os TLR, unha clase importante de PRR, xogan un papel crucial na defensa do hóspede ao inducir respostas inmunes innatas. Cada vez máis, os estudos indican que o LTA agonista de TLR2 está implicado na patoxénese das enfermidades infecciosas do SNC e pode inducir danos neuronais (Neher et al., 2011). A inhibición da activación de TLR2 atenúa a activación das células microgliais e o amiloide ? acumulación no cerebro (McDonald et al., 2016; Hossain et al., 2017). A transdución de sinal a través de TLR2 está mediada por diferentes proteínas adaptadoras, incluíndo MyD88, que promove a sinalización augas abaixo mediante a activación de MAPK e NF-?B que conduce á expresión de mediadores inflamatorios (Larochelle et al., 2015).   As moléculas inflamatorias e oxidativas son activadoras moi potentes de Keap-Nrf2 (factor 2 relacionado con NF-E2), que induce a expresión dos encimas de desintoxicación da Fase II para adaptarse á condición de estrés oxidativo (Rojo et al., 2010). Normalmente, Nrf2 actúa de forma inactiva. Tras a estimulación, Nrf2 sepárase de Keap1 e trasládase ao núcleo, onde se une ao elemento de resposta antioxidante (ARE) para activar a transcrición de xenes antioxidantes para a citoprotección (Ma, 2013; Cho et al., 2015). Un dos xenes regulados por Nrf2 é a hemoxixenase-1 (HO-1), que ten unha secuencia ARE na súa rexión promotora. Recentemente, informouse que HO-1 é un factor predominante no control do estrés oxidativo e das respostas inflamatorias en enfermidades neurodexenerativas (Schipper et al., 2009). O HO-1 é a primeira enzima inducible que limita a velocidade na degradación do hemo en subprodutos. O HO-1 pode proporcionar neuroprotección ou efecto neurotóxico debido ao equilibrio entre os efectos beneficiosos e tóxicos do hemo e dos produtos hemo (Mancuso et al., 2010). Demostrouse que un subproduto do HO-1, a bilirrubina, protexe as neuronas do estrés oxidativo in vivo e in vitro. A bilirrubina pódese oxidar a biliverdina eliminando os radicais peroxilo (Chen, 2014). Suxeriuse que HO-1, biliverdina e CO teñen propiedades antiinflamatorias (Jazwa e Cuadrado, 2010). Outro estudo suxeriu que os ratos que carecen de HO-1 eran vulnerables aos estímulos proinflamatorios e desenvolveron inflamación crónica debido aos niveis reducidos de ferro (Chora et al., 2007). Ademais, un estudo recente suxeriu que a regulación positiva das vías Nrf2 e HO-1 inhibiu significativamente a reacción inflamatoria na microglia activada (Kim et al., 2016). Nrf2 inhibiu a hiperactivación microglial suprimindo p38 MAPK e a vía de sinalización NF-?B (Kim BW et al., 2013). Demostrouse que o derrubamento de Nrf2 en ratos era hipersensible á neuroinflamación, como indica un aumento dos marcadores inflamatorios iNOS, IL-6 e TNF-? (Rojo et al., 2010). En consecuencia, Nrf2 e HO-1 foron considerados obxectivos terapéuticos importantes para enfermidades neurodexenerativas (Koh et al., 2011; Zhang et al., 2014).   Curcumina, o principal curcuminoide illado de Curcuma longa L. (cúrcuma) utilizouse durante séculos no sueste asiático tanto como remedio medicinal como alimento (Kunnumakkara et al., 2017). A curcumina, a demetoxicurcumina, a bisdemetoxicurcumina, a ar-turmerona, a ?-turmerona e a ?-turmerona son os principais compostos bioactivos que se atopan en C. longa. Nos estudos farmacolóxicos modernos, C. longa, especialmente a curcumina, mostraron actividades farmacolóxicas prometedoras debido aos seus efectos antineuroinflamatorios, neuroprotectores, quimiopreventivos, inmunomoduladores e potencialmente quimioterapéuticos (Garcia-Alloza et al., 2007; Zhou et al., 2017). Un estudo anterior mostrou que a curcumina inhibe as respostas inflamatorias inducidas por LPS nos macrófagos RAW264.7, o que suxire un papel potencial da curcumina na infección bacteriana anti-Gram-negativa (Zhou et al., 2017) e investigacións tanto in vivo como in vitro demostraron que a curcumina presenta efectos antiinflamatorios (Garcia-Alloza et al., 2007; Prakobwong et al., 2011; Parada et al., 2015; Li et al., 2016). Ademais, tamén se informou que a curcumina promove o desenvolvemento do fenotipo microglial M2 dun xeito dependente de HO-1 e reduce a indución de iNOS, protexendo as células microgliais contra o estrés oxidativo (Parada et al., 2015). No presente estudo, investigamos se a curcumina podería afectar a activación microglial inducida por LTA. O ligando TLR2 LTA é un constituínte principal da parede celular das bacterias Gram positivas.  

Materiais e Métodos

Obras

A curcumina e outros reactivos compráronse en Sigma (C7727,> 80%, St. Louis, MO, Estados Unidos). Protoporfirina IX (SnPP) e anticorpos dirixidos contra HO-1 (sc-390991) - Nrf2 (sc-722), proteína de unión a TATA (TBP; sc-74595), β-tubulina (sc-134237) e β -actina (sc-130065) - compráronse en Santa Cruz Biotechnology, Inc., (Dallas, TX, Estados Unidos). Anticorpos dirixidos contra iNOS (13120) - fosforilado (p) -MAPK (9910s), MAPK (9926), proteína quinasa B (Akt; 4685), p-Akt (13038) e un kit de ruta NF-? B (9936) - compráronse en Cell Signaling Technology, Inc., (Danvers, MA, Estados Unidos). O LTA obtívose de InvivoGen (tlrl-pslta, Toulouse, Francia). Ademais, o inhibidor JNK (inhibidor JNK II; 420119), o inhibidor Akt (wortmannin; 12-338), o inhibidor ERK (PD98059, 513000) e o inhibidor p38 (SB230580, 559395) compráronse en EMD Millipore (Billerica, MA, Estados Unidos) ). O medio de cultivo celular, DMEM e o soro bovino fetal (FBS) compráronse a Gibco BRL (agora Invitrogen Corporation, Carlsbad, CA, Estados Unidos).  

Cultura celular

As células microgliais BV-2 de rato foron adquiridas de ATCC. Cultiváronse as células en DMEM complementado cun 10% de FBS inactivado por calor e un 0.1% de penicilina-estreptomicina (BioSource International, Camarillo, CA, Estados Unidos) a 37 °C nunha atmosfera humidificada de 5% de CO2 e 95% de aire.  

Ensaio de viabilidade móbil

A citotoxicidade da curcumina avaliouse mediante un ensaio colorimétrico baseado en [3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio] (MTT). As células incubáronse en placas de 24 pozos a unha densidade de 5-105 células por pozo. A solución MTT (5 ml de 5 mg/ml) engadiuse a cada pozo (concentración final 62.5 mg/ml). Tras a incubación durante 3 h a 37 °C nun 5% de CO2, eliminouse o sobrenadante e os cristais de formazán producidos en células viables solubilizáronse con 150 ml de dimetilsulfóxido (DMSO). A absorbencia de cada pozo foi entón lida a 570 nm usando un lector de microplacas (Wallac 1420; PerkinElmer, Inc., Boston, MA, Estados Unidos).  

Medición da concentración de nitrito

A síntese de NO en cultivos celulares foi medida polo método Griess con microplaca. Para medir o nitrito, elimináronse alícuotas de 100- l do medio acondicionado e incubáronse cun volume igual de reactivo Griess [1% sulfanilamida / 0.1% N- (1-naftil) -etilendiaminodiclorhidrato / 2.5% H3PO4] a temperatura ambiente durante 10 min. A concentración de nitrito determinouse medindo a absorbancia a 540 nm cun espectrofotómetro de microplaca de 96 pozos Vmax (Molecular Devices, Menlo Park, CA, Estados Unidos). O nitrito de sodio utilizouse como estándar.  

Medición de TNF-? e concentración de PGE2

As células incubáronse primeiro con varias concentracións de curcumina durante 1 h e despois con LTA durante 16 h. Despois de 24 h de incubación, TNF-? e os niveis de PGE2 cuantificáronse nos medios de cultivo mediante un kit de ensaio inmunoabsorbente ligado a encimas (ELISA) (R&D Systems, Minneapolis, MN, Estados Unidos) segundo as instrucións do fabricante.  

Preparación do extracto nuclear

As células microgliais BV-2 laváronse tres veces con PBS frío e recolléronse en 3000 µl de PBS mediante centrifugación a 800 µg durante 5 min (4 ºC). Os gránulos celulares foron suspendidos no tampón A [HEPES-KOH 10 mM (pH 7.9); MgCl1.5 2 mM; KCl 10 mM; ditiotreitol 0.5 mM (DTT); inhibidor de protease (PI) 0.2 mM] e incubóuse durante 5 min en xeo. Tampón B [HEPES-KOH 10 mM (pH 7.9); MgCl1.5 2 mM; NaCl 420 mM; EDTA 0.2 mM; glicerol 25% v/v; 0.1 mM TDT; Engadiuse 0.2 mM PI] ao extracto celular e incubouse en xeo durante 5 minutos antes da centrifugación a 11,000 µg durante 1 min a 4ºC. As proteínas nucleares foron extraídas coa adición do tampón de lise B completo [HEPES-KOH 10 mM (pH 7.9); MgCl1.5 2 mM; KCl 10 mM; 0.5 mM TDT; 0.2 mM PI; 25% (p/v) de glicerina; NaCl 420 mM; EDTA 0.2 mM] durante 30 min a 4 °C con vórtice ocasional. Despois da centrifugación a 11,000 µg durante 5 min a 4 °C, os sobrenadantes foron recollidos e almacenados a -70 °C.  

Western Blot Analysis

As células BV-2 recolléronse nun tampón de lise xeado (1 % de Triton X-100; 1 % de desoxicolato; 0.1 % de dodecilsulfato de sodio). O contido proteico dos lisados ​​celulares determinouse posteriormente usando o reactivo de Bradford (Bio-Rad Protein Assay Kit I5000001; Bio-Rad Laboratories, Inc., Hercules, CA, Estados Unidos). As proteínas totais en cada mostra (50 ?g) foron separadas por SDS-PAGE ao 7.5% e transferidas a membranas de difluoruro de polivinilideno. Tras o bloqueo dos sitios de unión inespecíficos con leite sen graxa ao 5% a temperatura ambiente durante 30 min, as membranas foron incubadas con anticorpos primarios dirixidos contra iNOS (1:500), p-Akt (1:1,000), p- MAPK (1:1,000), MAPK (1:1,000), p-p65, p65 (1:500), pI?B?, I?B? (1:1,000), HO-1 (1:1,000), Nrf2 (1:1,000), TBP (1:3,000), ? (1:1,000), HO-1 (1:1.0) e actina (1:3,000) durante 16 h a 4 °C. Seguiuse coa incubación con anticorpos secundarios anti-coello (sc-2768; 1:5,000) ou anti-rato (sc-2371; 1:5,000) conxugados con peroxidase de rábano picante (Santa Cruz Biotechnology, Inc.) a temperatura ambiente durante 1. h. Utilizouse a tubulina como control de carga para cada carril. As proteínas foron visualizadas mediante un kit de detección de quimioluminiscencia mellorada (GE Healthcare, Chicago, IL, Estados Unidos). Despois do lavado con PBS con Tween-20, as bandas de proteínas foron visualizadas usando o Gel Docsed como control de carga para cada pista. As proteínas foron visualizadas mediante un analizador Quant 350 (GE Healthcare).  

RT-PCR en tempo real

Illouse o ARN total das células mediante un kit de illamento de miniARN de spin de ARN (GE Healthcare, Uppsala, Suecia) segundo as instrucións do fabricante. O ADNc sintetizouse a partir de 1 ?g de ARN total usando Maxime RT PreMix (Takara, Gyeonggi-do, Xapón) e cebadores oligo-dT15 ancorados. A PCR en tempo real realizouse mediante un instrumento Chromo4TM (Bio-Rad) e SYBR Green Master Mix (Applied Biosystems, Foster City, CA, Estados Unidos). As cantidades relativas de ARNm diana determináronse mediante o método do limiar comparativo (Ct) normalizando os valores de Ct do ARNm diana aos da ?-actina (Ct). As secuencias primas utilizadas no estudo mostráronse na Táboa ?1.  

Análise Estatística

Os datos exprésanse como a media (desviación estándar, SD). Cada experimento repetiuse polo menos tres veces. A análise estatística realizouse mediante o paquete estatístico para o software GraphPad Prism (versión 16.0) para determinar diferenzas significativas. Usamos a proba t de Student ou a análise unidireccional da varianza (ANOVA) seguida das probas post hoc de Dunn para as análises. Os valores p < 0.05 consideráronse estatisticamente significativos.  

Resultados

A curcumina non afectou a viabilidade das células

Realizáronse experimentos de viabilidade celular para determinar se as concentracións de curcumina utilizadas neste estudo afectaron á viabilidade da microglia BV2. A figura ?1 mostra que a curcumina no intervalo de concentración de 5-20 ?M, xunto con ou sen 5 ?g/ml de LTA, non produciu citotoxicidade na microglia BV2. Polo tanto, usamos estas concentracións de curcumina para estudos posteriores.  

A curcumina impediu a produción de moléculas neuroinflamatorias en microglias activadas por LTA BV2

Para investigar os efectos da curcumina na secreción de citocinas inflamatorias, as células BV2 foron tratadas con LTA en presenza e ausencia de curcumina durante 24 h. A curcumina non se eliminou antes da adición de LTA. Liberación de NO, PGE2 e TNF-? reducíronse de forma significativa e dependente da dose pola curcumina (Figuras 2A�C). Ademais, o LTA aumentou a expresión de ARNm de iNOS e COX-2. A incubación con curcumina suprimiu a expresión de ARNm de COX-2 e iNOS en células microgliais BV2 estimuladas por LTA dun xeito dependente da concentración (figuras 2D, E).  

A curcumina suprimiu a activación inducida por LTA de NF-? B en células microgliais BV-2

Os xenes que codificaban a expresión de proteínas inflamatorias en resposta á activación microglial estaban baixo o control de transcrición de NF-? B. Polo tanto, examinamos o efecto da curcumina na activación de NF-? B en células microgliais estimuladas por LTA. Os resultados mostraron que o LTA induciu un aumento característico da fosforilación de I? B ?. Despois do tratamento previo con curcumina, os niveis de pI? B? reducíronse significativamente de xeito dependente da concentración (Figura? 3 e Figura Complementaria S1). De xeito coherente, a translocación nuclear da subunidade NF-? B p65 inducida por LTA tamén se atenuou mediante o tratamento previo con curcumina. En conxunto, a curcumina probablemente atenúe a expresión de moléculas neuroinflamatorias ao suprimir a translocación nuclear e a activación de NF-? B. A cuantificación con análise estatística proporcionouse como datos de apoio.  

Activación inducida por LTA de curcumina de p38 e ERK MAPK en células microgliales BV-2

Ademais de NF-?B, as MAPK tamén son moduladores augas arriba de moléculas neuroinflamatorias nas células microgliais. Estudos anteriores demostraron que a curcumina antagonizaba a fosforilación de MAPK inducida por LPS nos micrófagos (Yang et al., 2008; Kunnumakkara et al., 2017). Para investigar se a curcumina inhibe a neuroinflamación mediante a regulación das MAPK, examinamos os seus efectos na fosforilación de MAPK inducida por LTA. As células microgliais BV-2 foron pretratadas con diferentes concentracións de curcumina durante 3 h e despois estimuláronse con LTA durante 1 h. Como se mostra na figura ?4A e na figura complementaria S2, a curcumina inhibiu a fosforilación de ERK, p38 e Akt inducidas por LTA. Non obstante, ata 20 ?M de curcumina non afectou á fosforilación de JNK inducida por LTA. Informese que a vía das MAPK media na produción de citocinas, quimiocinas e outras moléculas neuroinflamatorias. Polo tanto, a continuación investigamos o papel de ERK, p38, JNK e Akt na produción de moléculas neuroinflamatorias das células BV2 utilizando os inhibidores de ERK, p38, JNK e Akt. Non obstante, só o inhibidor de p38 SB203580 diminuíu significativamente a liberación inducida por LTA de NO e os niveis de expresión de ARNm de iNOS (figuras 4B, C). Aínda que a fosforilación de JNK non foi inhibida pola curcumina, o inhibidor de JNK II inhibiu significativamente a liberación de NO inducida por LTA (Figura ? 4B). Os resultados suxiren que as vías de sinalización das MAPK están implicadas nos efectos antineuroinflamatorios da curcumina na microglia estimulada por LTA. A cuantificación con análise estatística ofrécese como datos de apoio.  

A inhibición da sinalización HO-1 eliminou o efecto inhibidor da curcumina sobre as respostas neuroinflamatorias

HO-1 actúa como un modulador antiinflamatorio e antioxidante na microglia (Schipper et al., 2009). As análises de Western blot e RT-PCR mostraron que a curcumina regulaba a expresión de HO-1 nos niveis de proteína e ARNm, como se mostra nas figuras 5A�D e na figura complementaria S3. A expresión de ARNm e proteína de HO-1 aumentou ao máximo nas células microgliais BV-2 tratadas con curcumina 20 ?M durante 4 e 8 horas respectivamente. Ademais, a curcumina aumentou a translocación nuclear de Nrf2 en 1 h e prolongou o seu estado de translocación nuclear a 2 h (figuras 5E, F e figura complementaria S3). A continuación, investigamos se a HO-1 inducida pola curcumina mediaba unha resposta antineuroinflamatoria nas células microgliais BV-2 estimuladas por LTA. Tratamos células co inhibidor de HO-1 SnPP. Despois avaliamos o efecto da curcumina sobre o NO inducido por LTA e o TNF-? liberar. O tratamento con SnPP suprimiu significativamente a inhibición da liberación de NO e TNF-a mediada pola curcumina (Figuras 5G, H). En conxunto, estes resultados revelan que a activación do sinal HO-1 e Nrf-2 dependente da curcumina xoga un papel crucial na regulación negativa das respostas neuroinflamatorias. A cuantificación con análise estatística ofrécese como datos de apoio.  

Conversa

A microglía, os principais macrófagos residentes do SNC, foi descrita como as principais células efectoras na mediación da neuroinflamación e da morte neuronal selectiva (Perry et al., 2010). As células microgliais aumentan a produción de moléculas neuroinflamatorias despois da exposición a activadores como LPS e LTA a través dos seus receptores de superficie, TLR4 e TLR2, respectivamente (Perry e Holmes, 2014; Hossain et al., 2017). O aumento da expresión e activación de TLR2 está asociado coa progresión de enfermidades neurodexenerativas, como a EP e a demencia (Dzamko et al., 2017). Por exemplo, a activación de TLR2 podería aumentar a ?-sinucleína nos cerebros de PD e desempeñar un papel importante na patoxénese dos cerebros de PD (Roodveldt et al., 2013). Ademais, Kim C. et al. (2013) tamén mostraron que a neurodexeneración foi atenuada pola eliminación ou a caída de TLR2 en modelos de PD de roedores. Así, o control da activación da microglia mediada por TLR2 e da neurotoxicidade suxeriuse como un enfoque terapéutico importante para tratar enfermidades neurodexenerativas. Un axente potencial neste proceso podería ser a curcumina, que se demostrou que exerce efectos neuroprotectores e antiinflamatorios en varios modelos experimentales (Parada et al., 2015; Li et al., 2016). A curcumina é un composto natural altamente lipófilo. Un estudo anterior demostrou ben que a curcumina é capaz de atravesar a barreira hematoencefálica e que se concentra principalmente no hipocampo do cerebro (Tsai et al., 2011). Algúns estudos informaron de que a curcumina inhibiu o dano neuronal inducido polo VIH-1 gp120 e proporcionaba efectos antineuroinflamatorios na microglia inducida por LPS (Gong et al., 2012). Este efecto protector da curcumina parece depender das súas accións antiinflamatorias. A curcumina podería protexer as neuronas contra a neurotoxicidade mediada pola microglia mentres se volve ineficiente en condicións de esgotamento da microglia (Park et al., 2001; Yang et al., 2008; Parada et al., 2015). Estudos similares en células periféricas tamén mostraron os efectos antiinflamatorios da curcumina. Usando macrófagos murinos RAW 264.7, os estudos demostraron que a curcumina inhibe PGE2, NO e TNF-? liberación despois da estimulación con LPS (Pae et al., 2008). Non obstante, os efectos da curcumina na neuroinflamación inducida por TLR2 nas células microgliais non se comprenden completamente.   A regulación das vías de sinalización na microglia activada é importante para manter a homeostase do SNC porque as respostas neuroinflamatorias desreguladas poden producir a morte de neuronas adxacentes mediante a liberación de moléculas inflamatorias, como citocinas, quimiocinas, NO e ROS (Perry e Holmes, 2014; Spangenberg e Green, 2017). Por exemplo, a síntese excesiva de NO baixo endotoxinas produce a formación de especies reactivas de nitróxeno e a morte das células neuronais (Perry et al., 2010). Tamén se demostrou que a PGE2 contribúe á morte neuronal mediante a activación da vía MAPK/ERK na microglia (Xia et al., 2015). Neste estudo, demostramos que a curcumina inhibe a secreción dos mediadores inflamatorios TNF-?, NO e PGE2, e a expresión de iNOS e COX-2 na microglia BV2 estimulada con LTA. Ademais, demostramos que a curcumina atenuou estes efectos da LTA sen alterar a supervivencia celular, o que suxire que a curcumina é segura e que podería considerarse un axente terapéutico potencial na neuroinflamación.   NF-?B é o principal factor de transcrición que xoga un papel crítico na regulación da homeostase redox. NF-?B considérase o regulador mestre das respostas inflamatorias da microglia á lesión neuronal (Acharyya et al., 2007). Estudos recentes demostraron que a activación de NF-?B controlaba a expresión de moléculas inflamatorias, como NO, PGE2 e TNF-?, e a produción de IL-1b (Acharyya et al., 2007). Polo tanto, a modulación da activación de NF-?B considérase unha forma crítica de controlar a activación da microglia. A activación da vía de sinalización NF-?B está mediada pola proteína I?B. A fosforilación de I?B produce a disociación de NF-?B, o que leva á indución de mediadores inflamatorios. Neste estudo, demostrouse que a curcumina produciu a dobre inhibición da fosforilación e degradación de I?B?, así como a translocación nuclear de p65, o que suxire que este axente podería estabilizar NF-?B no citoplasma microglial despois da estimulación con LTA na BV. -2 células microgliais.   Nas células de mamíferos, as vías de sinalización de MAPK, incluíndo ERK, JNK e p38, contribúen á produción dunha gran variedade de mediadores neuroinflamatorios (Chantong et al., 2014). Neste estudo, o pretratamento con curcumina diminuíu a fosforilación de p38 e ERK. Ademais, o inhibidor de p38 SB203580 reduciu significativamente a secreción de NO e a expresión do ARNm do xene proinflamatorio clave, iNOS. Estes resultados suxiren que a curcumina iniciou os efectos antineuroinflamatorios nas células microgliais BV-2 estimuladas por LTA, parcialmente mediante a inhibición da activación de p38 MAPK. A vía de sinalización dependente de PI3K/Akt promove respostas inflamatorias na microglia. A implicación da vía Akt mostrouse na expresión de mediadores inflamatorios na microglia mediante a activación de NF-?B na microglia (Lo et al., 2015). A curcumina suprimiu o Akt fosforilado, o obxectivo augas abaixo de PI3K. Non obstante, o inhibidor de PI3K wortmanina non mostrou ningún efecto inhibidor sobre a secreción de NO ou a expresión do ARNm de iNOS. En conxunto, estes datos suxiren que o efecto antineuroinflamatorio da curcumina prodúcese principalmente pola inhibición da sinalización de NF-?B e MAPK.   Tamén identificamos a vía intracelular que regula negativamente a expresión de moléculas inflamatorias nas células microgliais. Nrf2 é un factor de transcrición sensible ao redox que regula as respostas inflamatorias da microglia ás infeccións cerebrais. O efecto de Nrf2 foi descrito en diferentes modelos in vivo onde o derrumbe de Nrf2 en ratos aumentou a vulnerabilidade ao asma ou ao enfisema (Ma, 2013). Ademais, o agonista de TLR2/TLR4 promoveu respostas inflamatorias nos ratos Nrf2 KO en comparación cos ratos WT (Kong et al., 2011). No estudo actual, demostramos que a curcumina aumentou a expresión de Nrf2 e a súa proteína HO-1. HO-1 é unha molécula de sinalización clave implicada na regulación das respostas inflamatorias e oxidativas. O xene HO-1 ten unha secuencia ARE na súa rexión promotora, que é un sitio de unión para o factor de transcrición Nrf2. Varios estudos propuxeron que NF-?B interrompe a vía de sinalización Nrf-2-ARE porque moitos compostos que inducían a sinalización de HO-1 e Nrf2 reprimiron incidentalmente a activación de NF-?B (Li et al., 2016). A expresión de HO-1 foi esencial para o efecto citoprotector específico da microglia (Parada et al., 2015). Varios estudos tamén demostraron unha correlación inversa entre HO-1 e a secreción do mediador inflamatorio (Chora et al., 2007; Parada et al., 2015). De acordo, observamos que a curcumina por si soa inducía a expresión de HO-1 nas células microgliais.  

Conclusión

Este estudo demostrou que a curcumina tiña actividade antiinflamatoria en células microgliais estimuladas por LTA que poden inhibindo a activación de NF-? B e p38 MAPK e poden inducir a expresión de Nrf2 e HO-1 (Figura? 6). Ademais, a curcumina non ten efectos citotóxicos nas células microgliais BV-2 na súa dose antiinflamatoria. A curcumina pode ter potencial terapéutico para algúns trastornos asociados á neuroinflamación causados ​​por bacterias Gram-positivas.   �

A curcumina ou cúrcuma é un poderoso antiinflamatorio que demostrou ter moitos beneficios para a saúde. Considerado como un antioxidante con propiedades anti-cancro, antidepresivo e anti-envellecemento, a curcumina pode facer moito máis que curar feridas e mellorar a memoria. Segundo estudos de investigación, a curcumina ou a cúrcuma poden axudar a reducir a neuroinflamación ou a inflamación cerebral. Este poderoso antiinflamatorio pode bloquear a produción de citocinas proinflamatorias e promover o benestar xeral. - Dr. Alex Jiménez DC, CCST Insight

 

---

 

Formulario de avaliación de neurotransmisores

[wp-embedder-pack width=”100%” height=”1050px” download=”all” download-text=”” attachment_id=”72741″ /] O seguinte formulario de avaliación de neurotransmisores pódese cubrir e presentar ao Dr. Alex Jiménez. Os síntomas enumerados neste formulario non pretenden ser utilizados como diagnóstico de ningún tipo de enfermidade, afección ou calquera outro tipo de problema de saúde.  

---

  En honra á proclamación do gobernador Abbott, outubro é o mes da saúde quiropráctica. Coñece máis a proposta.   Cantas veces te sentes axitado, facilmente molesto e nervioso entre as comidas? Cantas veces dependes do café para seguir adiante? ¿Con cantas veces tes dificultades para concentrarte antes de comer? A inflamación é unha resposta importante do corpo humano. É activado polo sistema inmunitario para protexernos contra lesións, infeccións e / ou enfermidades. Non obstante, que ocorre se hai moita inflamación no corpo humano? E, que pasa se hai moita inflamación no cerebro? � A inflamación do cerebro pode causar unha variedade de problemas de saúde, como ansiedade, estrés, depresión, néboa cerebral, fatiga e mesmo letargo, entre outros síntomas comúns. Afortunadamente, hai un remedio natural que pode axudar a reducir en gran medida a neuroinflamación e mellorar a función cerebral. Segundo estudos de investigación, a curcumina pode combater a inflamación do cerebro. O propósito do artigo anterior era discutir os efectos antiinflamatorios da curcumina na microglia e no benestar do cerebro. Centro Nacional de Información de Biotecnoloxía (NCBI). O alcance da nosa información está limitado a problemas de saúde quiroprácticos, musculoesqueléticos e nerviosos ou artigos de medicina funcional, temas e discusións. Utilizamos protocolos de saúde funcionais para tratar lesións ou trastornos do sistema músculo-esquelético. Para falar máis sobre o tema anterior, non dubide en preguntar ao doutor Alex Jiménez ou en contacto con nós 915-850-0900 .   Comisariado polo Dr. Alex Jiménez  

---

 

Discusión adicional sobre temas: dor crónica

A dor repentina é unha resposta natural do sistema nervioso que axuda a demostrar unha posible lesión. A título de exemplo, os sinais de dor viaxan dende unha rexión lesionada polos nervios e a medula espiñal ata o cerebro. A dor xeralmente é menos grave xa que a lesión cura, con todo, a dor crónica é diferente do tipo medio de dor. Con dor crónica, o corpo humano continuará enviando sinais de dor ao cerebro, independentemente de que a lesión se cura. A dor crónica pode durar varias semanas ata varios anos. A dor crónica pode afectar tremendamente a mobilidade dun paciente e pode reducir a flexibilidade, a forza e a resistencia.    

---

 

Neural Zoomer Plus para enfermidades neurolóxicas

O doutor Alex Jiménez utiliza unha serie de probas para axudar a avaliar enfermidades neurolóxicas. O Zoomer Neural^TM Plus é unha serie de autoanticorpos neurolóxicos que ofrece un recoñecemento específico de anticorpos a antíxenos. O Zoomer Neural Vibrante^TM Plus está deseñado para avaliar a reactividade dun individuo a 48 antíxenos neurolóxicos con conexións a unha variedade de enfermidades relacionadas neuroloxicamente. O Vibrant Neural Zoomer^TM Plus ten como obxectivo reducir as condicións neurolóxicas capacitando a pacientes e médicos cun recurso vital para a detección precoz de riscos e un foco maior na prevención primaria personalizada.  

Fórmulas para o soporte de metilación

 

XIMOGENES Existen fórmulas profesionais exclusivas a través de profesionais de coidados de saúde con licenza selectiva. A venda por internet e o desconto das fórmulas XYMOGEN están estrictamente prohibidas.

 

Con orgullo, Dr. Alexander Jimenez fai que as fórmulas XYMOGEN estean dispoñibles só para os pacientes baixo o noso coidado.

 

Por favor, chame á nosa oficina para que poidamos asignar unha consulta médica para o acceso inmediato.

 

Se es paciente de Clínica de lesións médicas e quiroprácticas, pode preguntar sobre XYMOGEN chamando 915-850-0900.   Para a súa comodidade e revisión do XYMOGEN produtos por favor, revise a seguinte ligazón. *XYMOGEN-Catálogo-descargar   * Todas as políticas anteriores de XYMOGEN seguen estando en vigor.  

---